3.2. Исследование динамики накопления и внутриклеточной локализации тетраарилтетрацианопорфиразинов

На начальном этапе исследования методом спектрофлуориметрии нами была определена зависимость накопления исследуемых тетраарилтетрацианопорфиразинов в опухолевых клетках в культуре от времени инкубации и концентрации красителя в среде (рисунок 19).
Исходя из зависимости, представленной на рисунке 19а, для дальнейших исследований был выбран диапазон концентраций 5-15 мкМ. Было показано, что тетраарилтетрацианопорфиразины интенсивно накапливаются опухолевыми клетками уже в течение первых 30 минут после добавления в среду инкубации (рисунок 19).

Рисунок 19. Накопление опухолевыми клетками YbPz(II): (а) — в зависимости от концентрации (инкубация 30 минут); (б) — в зависимости от времени инкубации (концентрация 10 мкМ)


Нами также было проведено исследование динамики внутриклеточного накопления Pz(I) ПЩ в режиме реального времени методом конфокальной микроскопии. Внесение в лунку планшета Pz(I) ПЩ в концентрации 5 мкМ приводило к увеличению сигнала в среде («фон») на 2-3 условные единицы, тогда как в цитоплазме клеток сигнал возрастал на 100 единиц менее чем за 20 минут наблюдения. Поскольку квантовый выход флуоресценции Pz(I) существенно зависит от параметров среды, в частности от её вязкости, полученные данные не могут быть напрямую использованы для расчета коэффициентов внутриклеточного накопления (отношения средней

цитоплазматической концентрации соединения к его концентрации в инкубационной среде).

Рисунок 20. Динамика накопления Pz(I) ПЩ (5 мкМ) в культуре клеток

А-431. Стрелкой отмечен момент добавления фотосенсибилизатора к клеткам. Показаны данные кривые для 7 индивидуальных клеток в поле зрения микроскопа. Черная линия соответствует иненсивности флуоресценции в среде вне клеток. Xex 633 нм, Xem 650-710 нм


Анализ накопления тетраарилтетрацианопорфиразинов, заключенных в различные полимерные наночастицы, показал, что тип полимера существенно влияет на величину сигнала флуоресценции. При одной и той же концентрации красителя для исследуемых полимеров интенсивность сигнала флуоресценции Pz(I) в клетке увеличивается в ряду ПЭГ

<< | >>
Источник: Шилягина Наталья Юрьевна. ИССЛЕДОВАНИЕ ТЕТРААРИЛТЕТРАЦИАНОПОРФИРАЗИНОВ В КАЧЕСТВЕ ПОТЕНЦИАЛЬНЫХ ФОТОСЕНСИБИЛИЗАТОРОВ ДЛЯ ФОТОДИНАМИЧЕСКОЙ ТЕРАПИИ И ФЛУОРЕСЦЕНТНОЙ ДИАГНОСТИКИ. 2014

Еще по теме 3.2. Исследование динамики накопления и внутриклеточной локализации тетраарилтетрацианопорфиразинов:

  1. Шилягина Наталья Юрьевна. ИССЛЕДОВАНИЕ ТЕТРААРИЛТЕТРАЦИАНОПОРФИРАЗИНОВ В КАЧЕСТВЕ ПОТЕНЦИАЛЬНЫХ ФОТОСЕНСИБИЛИЗАТОРОВ ДЛЯ ФОТОДИНАМИЧЕСКОЙ ТЕРАПИИ И ФЛУОРЕСЦЕНТНОЙ ДИАГНОСТИКИ, 2014
  2. Специальные методы оценки антропогенных измененийи локализации нарушений окружающей среды
  3. ТЕОРИЯ СИСТЕМНОЙ ДИНАМИЧЕСКОЙ ЛОКАЛИЗАЦИИ ВЫСШИХ ПСИХИЧЕСКИХ ФУНКЦИЙ'
  4. Александр Романович Лурия (1920—1975) Теория системной динамической локализации высших психических функций в мозге
  5. УТЕЧКА, НАКОПЛЕНИЯ И ТЕЗАВРАЦИЯ
  6. Накопление арсенала
  7. ГЛАВА 8 Миф о «первоначальном накоплении»
  8.   2. ОБУЧЕНИЕ КАК УПРАВЛЕНИЕ ПРОЦЕССОМ НАКОПЛЕНИЯ ЗНАНИЙ  
  9. Накопление сведений б растениях и животных в первобытном обществе
  10.   5. ОБУЧЕНИЕ КАК УПРАВЛЕНИЕ ПРОЦЕССОМ НАКОПЛЕНИЯ ПОЗНАВАТЕЛЬНЫХ СТРУКТУР  
  11. Главо II ? КОНВЕНЦИЯ О ЗАПРЕЩЕНИИ ПРИМЕНЕНИЯ, * НАКОПЛЕНИЯ ЗАПАСОВ, ПРОИЗВОДСТВА И ПЕРЕДАЧИ ПРОТИВОПЕХОТНЫХ МИН И ОБ ИХ УНИЧТОЖЕНИИ
  12. Накопление данных о развитии органического мира в 20—30-е годы XIX века ,
  13. Тема 44. Национальный доход, его распределение и перераспределение. Фонд накопления и фонд потребления.